Cell Meter 細菌活力檢測試劑盒是用于檢測細菌活力的試劑盒。該試劑盒使用我們的綠色熒光核酸染色MycoLight Green和紅色熒光核酸染色碘化丙啶的混合物。單獨使用時(shí)，MycoLight Green染色劑通常標記人群中的所有細菌（活的和死的）。相比之下，碘化丙錠僅滲透膜受損的細菌，當存在兩種染料時(shí)，導致MycoLight Green染色熒光減少。因此，使用MycoLight Green和碘化丙錠染料的適當混合物，具有完整細胞膜的活細菌發(fā)出綠色熒光，而具有受損膜的死亡或垂死細菌產(chǎn)生紅色熒光。 Mycolight 細菌活力檢測試劑盒是一種強大的工具，用于監測細菌群體的活力，作為細胞膜完整性的函數。可以在510-530nm（FITC濾光器）和600-660nm（德克薩斯紅色濾光器）下熒光測量染色細胞，激發(fā)波長(cháng)為最常見(jiàn)的激發(fā)光源488nm。

操作方法

溶液配制

染料工作溶液（250X）：
在微量離心管中加入等體積的MycoLight Green（組分A）和碘化丙啶（組分B）并充分混合。 注意：每次準備新鮮的工作溶液。

樣品實(shí)驗方案

1.在任何適當的培養基中培養細菌從對數期培養物中獲得健康細菌的最佳結果。在0.85％NaCl或適當的緩沖液中將細菌培養物稀釋至~106至108個(gè)細胞/ mL。準備足夠的懸浮液，為流式細胞儀每次測試提供500μL，或為96孔板提供每次測試100μL。注意：在染色細菌之前去除生長(cháng)培養基的痕跡。單次洗滌步驟通常足以從細菌懸浮液中除去顯著(zhù)痕量的干擾介質(zhì)組分。建議不要使用磷酸鹽清洗緩沖液，因為它們會(huì )降低染色效率。

2.向每mL細菌懸浮液中加入4μL染料工作溶液（250X）。充分混合并在室溫下孵育15分鐘。避光。

3.可以通過(guò)熒光顯微鏡，熒光酶標儀或流式細胞術(shù)分析染色的細菌細胞。

4.來(lái)自活細菌和死細菌的熒光可以與任何標準熒光素長(cháng)通濾光片組同時(shí)觀(guān)察。或者，可以用熒光素和德克薩斯紅過(guò)濾器組分別觀(guān)察活的（綠色熒光的）和死的（紅色熒光的）細胞。