我們的Live或Dead 可固定死細胞染色試劑盒是用于標記細胞的一組工具，用于細胞功能的熒光顯微鏡研究。 細胞的有效標記為研究時(shí)空背景下的細胞事件提供了一種有力的方法。 該特定試劑盒設計用于在紅色熒光中均勻標記固定的哺乳動(dòng)物細胞，以用于藍色或綠色激光激發(fā)的流式細胞儀應用。 該試劑盒使用專(zhuān)有的紅色熒光染料，與細胞成分結合后會(huì )發(fā)出更多的熒光。 試劑盒中使用的熒光染料被藍色（488 nm）和綠色激光（532 nm）充分激發(fā)到620 nm的熒光。 該套件為所有基本組件提供了優(yōu)化的細胞標記方案。 它是保存特定細胞熒光圖像的極佳工具，也可用于熒光流式細胞儀應用。

溶液配制

1.儲備溶液配制

所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環(huán)。
1.1 Stain It 活性染料原液（500X）：
將200 μL DMSO（組分B）添加到Stain It 反應性染料（組分A）的小瓶中，以得到500X Stain It 反應性染料儲備液。

樣品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的無(wú)疊氮化鈉和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液制備細胞。

2.用HHBS或您選擇的無(wú)疊氮化物和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液洗滌細胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的濃度在HHBS或您選擇的無(wú)疊氮化物和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液中重懸細胞。

4.將1 μL 500X Stain It 活性染料儲備液添加到0.5 mL細胞/測定中，并充分混合。

5.在室溫或37°C，5％CO₂的培養箱中避光保存20-60分鐘。 注意：應根據不同細胞系實(shí)驗確定最佳的染色濃度和孵育時(shí)間。

6.洗滌細胞兩次，然后用HHBS或您選擇的緩沖液重懸細胞。

7.根據需要固定細胞（可選）。

8.使用適當的激發(fā)/發(fā)射濾光片，使用流式細胞儀和/或熒光顯微鏡分析細胞。