Cell Meter 比色法細胞毒性檢測試劑盒是用于細胞毒性檢測的試劑盒，Cell Meter比色法細胞毒性檢測試劑盒 使用可溶于水的四唑染料。在電子載體（PMS）存在的細胞還原性條件下，該染料能產(chǎn)生水溶性的甲瓚。四唑鹽經(jīng)細胞脫氫酶變成橙色的甲瓚產(chǎn)物，它在培養基是可溶的。一定數目甲瓚產(chǎn)物與一定數目活細胞成比例。我們的試劑盒比其他基于四唑細胞毒性檢測試劑盒（如MTT、XTT）提供更強有力操作方案。不需要預混合，我們試劑盒四唑鹽染料直接加入細胞。此外，我們的試劑盒比其他四唑細胞毒性檢測試劑盒（如MTT、XTT）具有更高的靈敏度。能廣泛的使用多種設備平臺。適應于多種的研究，例如細胞粘附、細胞趨化、多耐藥性、細胞生存能力、凋亡和細胞毒性等。該試劑盒具備最佳的組分和實(shí)驗操作流程，適合于增殖或者不增殖的細胞，并能用于懸浮細胞或者貼壁細胞。

操作步驟

1.在具有黑色壁和透明底部的組織培養微孔板中每孔100至10,000個(gè)細胞。 將測試化合物添加到細胞中，并在37℃，5％CO 2培養箱中孵育所需的一段時(shí)間（例如24,48或96小時(shí)）。 對于空白孔（沒(méi)有細胞的培養基），加入相應量的化合物緩沖液。 對于96孔板，建議的總體積為100μL，對于384孔板，建議的總體積為50μL。

2.對照設置
2.1陽(yáng)性對照：含有細胞和已知的增殖或細胞毒性誘導劑。

2.2陰性對照：含有細胞但不含有測試化合物。

2.3載體對照：含有細胞和用于遞送測試化合物的載體。

2.4非細胞對照：含有不含細胞的生長(cháng)培養基。

2.5測試化合物對照：含有用于遞送測試化合物[Hank's平衡鹽溶液（HBSS）或磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）]和測試化合物的載體對照。 一些測試化合物具有強自發(fā)熒光并且可能產(chǎn)生假陽(yáng)性結果。 注意：對于96孔板，將所有對照的總體積與100μL匹配，對于具有生長(cháng)培養基的384孔板，將所有對照的總體積與50μL相匹配。

3.將測定溶液（組分A）預熱至37°C。 在開(kāi)始實(shí)驗之前徹底混合。

4.向每個(gè)孔中加入20μL（96孔板）或10μL（384孔板）的測定溶液（組分A）。 輕輕搖動(dòng)平板30秒，混合試劑。

5.將細胞在37°C，5％CO₂培養箱中孵育1-24小時(shí)，避光。 注意：適當的孵育時(shí)間取決于單個(gè)細胞類(lèi)型的代謝率和使用的細胞濃度。 優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗的孵育時(shí)間。 不推薦極長(cháng)的孵育時(shí)間，因為指示劑可以轉化為無(wú)色化合物。

6.用吸光度讀板儀在OD比率A570nm / A605nm下監測吸光度的增加。 OD₅₇₀與OD₆₀₅的比率用于確定每個(gè)孔中的細胞活力。 注意：細胞存活率與OD₅₇₀增加和OD₆₀₅減少成正比。