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溶酶體

LysoBrite 溶酶體綠色熒光探針

產(chǎn)品編號:C0301       CAS#:       Ex (nm):501 Em(nm):            分子式: 分子量:C0301        溶劑:DMSO        包裝:500 Tests 供貨狀態(tài):3-5天        儲存條件:低溫避光-20 零售價(jià)格: 1896.00

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產(chǎn)品描述

LysoBrite 溶酶體綠色熒光探針,用于標記活細胞的溶酶體。專(zhuān)有的溶解性染料可能通過(guò)溶酶體pH梯度選擇性地積聚在溶酶體中。 溶致指示劑是疏水性化合物,易于滲透完整的活細胞,并在進(jìn)入細胞后被捕獲在溶酶體中。 進(jìn)入溶酶體后,LysoBrite 試劑的熒光顯著(zhù)增強。 可以使用熒光成像,高內容成像,微孔板熒光測定法或流式細胞術(shù)測量所得熒光。 LysoBrite 橙色,紅色,深紅色和NIR試劑具有極高的光穩定性和優(yōu)異的細胞保留性,可用于各種研究,包括細胞粘附,趨化性,多藥耐藥性,細胞活力,細胞凋亡和細胞毒性。 它們適用于增殖和非增殖細胞,可用于懸浮細胞和貼壁細胞。溶酶體是細胞器,其含有酸水解酶以分解廢物和細胞碎片。 溶酶體消化多余的或破舊的細胞器,食物顆粒和吞噬的病毒或細菌。 溶酶體周?chē)哪ぴ试S消化酶在pH4.5下工作。 與微堿性胞質(zhì)溶膠(pH 7.2)相比,溶酶體的內部是酸性的(pH 4.5-4.8)。 溶酶體通過(guò)質(zhì)子泵和氯離子通道從細胞質(zhì)中泵送質(zhì)子穿過(guò)膜來(lái)維持這種pH差異。

 

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱(chēng)

規格

價(jià)格

C0501

LysoBrite 溶酶體

綠色熒光探針

500 Tests

1896RMB

 

操作方法

1.制備溶酶體染色溶液:

1.1解凍 LysoBrite 染料至室溫。

1.2通過(guò)將20μL的500 X LysoBrite 染料稀釋到10 mL Hanks和20 mm Hepes緩沖液或緩沖液(HBSS)中,制備染料工作溶液。

注1:對于一個(gè)96孔板,20μL的LysoBrite 染料就足夠了。 在<-15℃下等分并儲存未使用的LysoBrite 染料儲備溶液。 保護它免受光照,避免反復凍融循環(huán)。

注2:熒光溶酶體指示劑的最佳濃度根據具體應用而變化。 可以根據特定細胞類(lèi)型和細胞或組織對探針的滲透性來(lái)修改染色條件。

2.準備和染色細胞:

2.1貼壁細胞:a.在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在裝有適當培養基的培養皿內的蓋玻片上培養細胞。當細胞達到所需的匯合時(shí),加入等體積的染料加工溶液(來(lái)自步驟1.2)。 b.將細胞在37℃,5%CO2培養箱中孵育30分鐘。 c.用預熱(37℃)Hanks和20mM Hepes緩沖液(HBSS)或您選擇的緩沖液洗滌細胞兩次,用HBSS或生長(cháng)培養基填充細胞孔。 d.使用配有所需濾光片組的熒光顯微鏡觀(guān)察細胞。

注意:如果細胞看起來(lái)沒(méi)有充分染色,建議增加標記濃度或孵育時(shí)間以使染料積累。

2.2對于懸浮細胞:a.將等體積的染料加工溶液(來(lái)自步驟1.2)加入細胞中。將細胞在37℃,5%CO2培養箱中孵育30分鐘。 b.用預熱(37℃)Hanks和20mM Hepes緩沖液(HBSS)或您選擇的緩沖液洗滌細胞兩次,用HBSS或生長(cháng)培養基填充細胞孔。 c.使用配備有所需過(guò)濾器組的熒光顯微鏡觀(guān)察細胞。

注1:如果細胞看起來(lái)沒(méi)有充分染色,建議增加標記濃度或培養時(shí)間以使染料積累。

注2:懸浮細胞可以附著(zhù)在用BD Cell-Tak?(BD Biosciences)處理過(guò)的蓋玻片上,并作為粘附細胞染色(見(jiàn)步驟2.1)。



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