內質(zhì)網(wǎng)（ER）是真核生物細胞中的一種細胞器，其形成扁平的，膜封閉的囊或稱(chēng)為池狀的管狀結構的互連網(wǎng)絡(luò )。 ER的膜與外核膜連續。 ER在大多數類(lèi)型的真核細胞中發(fā)生，但在紅細胞和精子中不存在。 Cell Navigator 活細胞內質(zhì)網(wǎng)（ER）染色試劑盒使用我們的ER Tracer Green作為ER標記物。 ER Tracer 綠色染色是一種細胞滲透性熒光染料，對ER具有高度選擇性。 該染色劑由綠色熒光染料和ER粘合劑組成，其在大多數細胞類(lèi)型中選擇性地結合ER。 對于某些細胞，ER Tracer Green可能無(wú)法選擇性地與ER結合。 ER Tracer Green具有與FITC基本相同的光譜特性，使該試劑盒便于使用FITC濾光片組。

溶液配制

1.儲備溶液配制

        除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環(huán)。
ER Green 原液（500X）：
將20μLDMSO（組分C）加入到ER Green （組分A）的小瓶中并充分混合以制備500X ER Green 儲備溶液。 注意：20μL的500X ER Green 原液足以容納一個(gè)96孔板。 如果管子密封，未使用的500X ER Green 儲備溶液可以在≤-20oC下儲存兩周。 避光。

2.工作溶液配制

將20μL500XER Green 儲備溶液加入10 mL活細胞染色緩沖液（組分B）中，充分混合，制成ER Green 工作溶液。 該ER Green 工作溶液在室溫下穩定至少2小時(shí)。 避光。有關(guān)細胞樣品制備的指南，請點(diǎn)擊查看。

操作步驟

1.在細胞板中加入100μL/孔（96孔板）或50μL/孔（384孔板）的ER Green TM工作溶液。 用37℃的工作溶液孵育細胞15-30分鐘，避光。 注意：ER探針的最佳濃度根據具體應用而有所不同。 濃度高于工作溶液可能對細胞有毒。 可以根據特定細胞類(lèi)型和細胞或組織對探針的滲透性來(lái)修改染色條件。

2.在每個(gè)孔中移除ER Green 工作溶液。 用物理相關(guān)緩沖液洗滌細胞三次。

3.染色后修復細胞（可選）。 用4％甲醛固定細胞5-10分鐘。 用物理相關(guān)緩沖液洗滌細胞三次。

4.使用具有FITC濾光片組（Ex / Em = 490 / 520nm）的熒光顯微鏡觀(guān)察細胞中的熒光信號。