過(guò)氧化酶是常用于與抗體按4:1比例結合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小,因此在與抗體、抗原結合形成復合物時(shí)不會(huì )帶來(lái)空間阻礙。與其它酶標簽相比,過(guò)氧化酶也更便宜;其主要缺點(diǎn)是在保護劑(例如疊氮化鈉)存在的條件下溶解性低;而在低濃度下,過(guò)氧化酶的活性低。HRP偶聯(lián)物是廣泛用作ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗)、免疫組化技術(shù)、Northern、 Southern和Western blot分析的第二個(gè)檢測試劑。Amplite比色法過(guò)氧化酶檢測試劑盒 *藍色* 提供了一種快速(10分鐘)HRP一步法均質(zhì)的、無(wú)需洗脫的分析方案。本試劑盒使用Amplite Blue,我們的超靈敏HRP顯色底物,即Amplite Blue作為過(guò)氧化酶的顯色底物,它比雙氧水和過(guò)氧化酶及其它的過(guò)氧化酶的顯色底物(例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue)具有更高的靈敏度。Amplite Blue產(chǎn)生高吸收物質(zhì),在664nm處有最大吸收峰。這種近紅外吸收使自動(dòng)化檢測生物樣品時(shí)本底吸收很小。本試劑盒可以用于ELISA,酶促反應動(dòng)力學(xué)分析,氧化酶抑制劑高通量篩選等。試劑盒經(jīng)過(guò)最優(yōu)化處理,并且可用于高通量液體處理設備。
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 價(jià)格 |
R0303 | Amplite 熒光法過(guò)氧化酶檢測試劑盒 紅色熒光 | 500 Tests | 2544RMB |
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環(huán)。
1. Amplite 紅色過(guò)氧化物酶底物儲備液(100X):
將250μLDMSO(組分E)加入到Amplite 紅色過(guò)氧化物酶底物(組分A)的小瓶中以制備100X Amplite 紅色過(guò)氧化物酶底物儲備溶液。 應立即使用原液,避光。
2. HRP標準溶液(20 U / mL):
將1mL測定緩沖液(組分C)加入到辣根過(guò)氧化物酶(組分D)的小瓶中以制備20U / mL的HRP標準溶液。
3. H2O2儲備溶液(20 mM):
將22.7μL的3%H2O2(0.88M,組分B)加入977μL的測定緩沖液(組分C)中以制備20mM H2O2儲備溶液。 注意:稀釋的H2O2溶液不穩定。 應丟棄未使用的部分。
2.標準溶液
HRP標準
在1999μL分析緩沖液(組分C)中加入1μL的20U / mL HRP標準溶液,得到10mU / mL HRP標準溶液(SD7)。 取10 mU / mL HRP標準溶液(SD7)并進(jìn)行1:3連續稀釋?zhuān)玫竭B續稀釋的HRP標準品(SD6-SD1)和分析緩沖液(組分C)。
3.工作溶液
將50μL的100X Amplite 紅色過(guò)氧化物酶底物儲備溶液和50μL的20mM H2O2儲備溶液加入到4.9mL的測定緩沖液(組分C)中以制備HRP工作溶液,避光。