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酶分析

Amplite 熒光法D-乳酸檢測試劑盒

產(chǎn)品編號:G0402       CAS#:       Ex (nm):571 Em(nm):            分子式: 分子量:G0402        溶劑:        包裝:200 Tests 供貨狀態(tài):3-5天        儲存條件:低溫避光-20 零售價(jià)格: 3840.00

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產(chǎn)品描述

乳酸是手性的并且具有兩種光學(xué)異構體:L-乳酸和D-乳酸。 在代謝和運動(dòng)過(guò)程中,乳酸鹽通過(guò)乳酸脫氫酶(LDH)不斷從丙酮酸產(chǎn)生。 監測乳酸水平是評估組織需氧量和利用率之間平衡的好方法,在研究細胞和動(dòng)物生理學(xué)時(shí)非常有用。 D-乳酸不被哺乳動(dòng)物代謝,其從體內消除主要取決于腎臟排泄。 D-和L-乳酸存在于許多發(fā)酵乳制品中,例如酸奶和奶酪,以及腌制蔬菜,腌制肉類(lèi)和魚(yú)類(lèi)。 D-和L-乳酸含量是食品的質(zhì)量指標,如雞蛋,牛奶,果汁和葡萄酒。 血液中異常高濃度的D-乳酸通常是胃腸道中細菌過(guò)度生長(cháng)的反映。

Amplite 熒光法D-乳酸檢測試劑盒用于檢測L-乳酸鹽或D-乳酸鹽。 生物樣品,如血清,血漿,尿液,以及細胞培養樣品。 在酶偶聯(lián)測定中,乳酸與NADH成比例相關(guān),其通過(guò)熒光NADH傳感器特異性監測。 可以通過(guò)熒光酶標儀在Ex / Em = 540nm / 590nm下讀取信號。 使用這種Fluorimetric Amplite D-Lactate Assay Kit,我們能夠在100μL反應體積中檢測到少至1.4μM的D-乳酸。 它應用廣泛,可以很容易地適用于需要測量D-乳酸的各種應用。

 

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱(chēng)

規格

價(jià)格

G0402

Amplite 熒光法D-乳酸

檢測試劑盒

200 Tests

3840RMB

操作方法

1.準備N(xiāo)AD儲備溶液(100X):

向NAD小瓶(組分C)中加入100μLH2O,制成100X NAD儲備溶液。

2.準備D-乳酸儲備液:

將200μLH2 O或1×PBS緩沖液加入到D-乳酸鹽標準品(組分D)的小瓶中以制備100mM D-乳酸鹽標準溶液。

注意:未使用的D-lacate標準儲備溶液應分成單次使用的等分試樣并儲存在-20℃。

3.準備D-乳酸標準品(0至1 mM)的連續稀釋液:

3.1將10μLD-乳酸儲備溶液(來(lái)自步驟2)加入990L 1x PBS緩沖液中以產(chǎn)生1mM D-乳酸鹽標準溶液。

注意:稀釋的D-乳酸標準溶液不穩定,應在4小時(shí)內使用。

3.2取200μL的1mM D-乳酸標準溶液進(jìn)行1:3連續稀釋?zhuān)玫?00,100,30,10,3,1和0μM的D-乳酸標準品系列稀釋液。

3.3如說(shuō)明書(shū)中的表1和2中所述,將含有D-乳酸鹽標準品和含D-乳酸鹽的測試樣品的系列稀釋液加入到固體黑色96孔微量培養板中。

4.準備D-乳酸測定混合物:

4.1將5 mL測定緩沖液(組分B)加入一瓶酶混合物(組分A)中。

4.2將50μLNAD儲備液(100X,來(lái)自步驟1)加入組分A(來(lái)自步驟4.1)的瓶中,并且要混合均勻。

注意:這種D-乳酸測定混合物足以用于一個(gè)96孔板。未使用的D-乳酸測定混合物應分成單次使用的等分試樣并儲存在-20℃。

5.運行D-乳酸測定:

5.1將50μLD-乳酸測定混合物(來(lái)自步驟4.2)添加到D-乳酸標準品,空白對照和測試樣品(參見(jiàn)步驟3.3)的每個(gè)孔中,以使總D-乳酸測定體積為100μL/孔。

注意:對于384孔板,每孔加入25μL樣品和25μLD-乳酸測定混合物。

5.2在室溫下孵育反應30分鐘至2小時(shí),避光。

5.3用Ex / Em = 530-570 / 590-600nm的熒光板讀數器監測熒光增加(最佳Ex / Em = 540 / 590nm,在570nm處截止)



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